零基础多物种间共线性分析
首先非常感谢Cj大神开发出来的TBtools生信工具,为生信分析做图带来了极大的便利。作为生信小白,在做多物种间共线性分析时,尝试了多种方法,苦于没有计算机基础,一直没能完成,最后锁定TBtools的零命令行作图,几经摸索,终于成功,贼开心。
一、准备工作
1.下载各个物种的.gff文件和基因组序列文件
数据下载地址:[http://plants.ensembl.org/info/website/ftp/index.html]
2.工具TBtools:欢迎加入开发作者的QQ交流学习群(553679029),先看群公告哈。
二、将文件进行ID prefix,统一染色体名称。
打开TBtools
按步骤操作完成后,每个物种得到新的.gff文件和.fa文件,用于后续的共线性分析。
三、确定物种间的亲缘远近关系
目的:给各个物种安排的排序位置,例如我做的5个物种拟南芥、大豆、水稻、小麦和玉米,其中水稻、小麦和玉米属于禾本科植物,这三个物种之间的共线性关系自然是比较好的,但是具体的怎末连线还是不清楚,当然可以通过文献查找来确定,这里为了保险起见,我决定将所有物种两两组合,看共线性关系,先做两物种间共线性,再来排列。
两个物种间的共线性,请参考:https://www.jianshu.com/p/6c5a5a2d8fa7
注意:
1:OnestepMCscanX的比对时间因物种而已,比如小麦这种超大基因组的物种,我用小笔记本跑了两天,start后就静静等待了,建议最好多用几台电脑。
2:两物间共线性分析时,用ID prefix后的文件,只是链接里我用的原始文件。
结果:确定这几个物种的前后顺序为拟南芥、大豆、水稻、小麦、玉米,得到两两之间的比对结果文件。
四、比对文件合并与修改
完结撒花,最费时间的还是两物种间比对找远近关系,只要按照步骤来,很快就可以做出来的,加油!
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